文献类型：期刊文章

作　　者：赵爱志[1] 杨宇[2] 袁振华[2] 董小岩[2] 连忠辉[2] 崔莲仙[1] 吴小兵[2] 何维[1]

机构地区：[1]中国医学科学院基础医学研究所免疫室,北京100005 [2]本元正阳基因技术股份有限公司

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助(C0302050102)

年　　份：2005

卷　　号：25

期　　号：8

起止页码：630-633

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的利用大容量人源性SARS单链抗体库筛选N蛋白的特异性单链抗体。方法利用RTPCR的方法克隆了SARS病毒的N蛋白基因,克隆入原核表达载体pBV220,在大肠杆菌DH5α中进行表达并经离子交换色谱纯化后得到了纯度达95%以上的N蛋白,然后以此蛋白包被25cm2组织培养瓶,对SARS单链抗体库进行先松弛,后严谨的筛选、富集,进行4轮筛选后对所筛的抗体进行ELISA鉴定。结果经过4轮的筛选、富集,得到了1株高亲和力的N蛋白单链抗体N18。结论在对SARS疾病的早期检测或筛查、SARS病毒的生活周期及发病机理的研究中N18将起到重要的作用。

关 键 词：SARS冠状病毒 N蛋白 单链抗体库 SARS病毒 N蛋白基因 库筛选  异性  RT-PCR  PBV220 原核表达载体  

分 类 号：R392]