文献类型：期刊文章

作　　者：朱毅[1] 朱进[2] 冯振卿[1] 徐璐[1] 李芸茜[1] 仇镇宁[2] 管晓虹[2]

机构地区：[1]南京医科大学病理学教研室,南京210029 [2]南京医科大学纳米技术研究中心

出　　处：《中国血吸虫病防治杂志》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)(ID:2002AA214181)

年　　份：2005

卷　　号：17

期　　号：4

起止页码：241-245

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体,并初步鉴定表达产物活性。方法应用SOE法扩增双链抗体基因VH-linker-VL(Diabody,简称D)。将D重组入原核表达载体pBAD/gⅢ。表达质粒转化E.coliTOP10,左旋阿拉伯糖诱导表达。对D的表达产物进行分离纯化,采用Dot-ELISA法检测纯化蛋白与NP30、可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWAP)的结合活性。结果测序证实双链抗体基因D构建成功;构建了D的原核表达系统,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为27kD;经纯化、变性复性后用Dot-ELISA法鉴定结果表明,D表达的纯化蛋白可与NP30特异性结合。结论所构建、表达的NP48单特异性双链抗体具有亲本单抗的部分特性。

关 键 词：日本血吸虫 抗抗独特型抗体  双链抗体  蛋白表达 Dot—ELISA  

分 类 号：R383.24]