文献类型：期刊文章

作　　者：张小猛[1] 徐春玲[1] 庞利民[1] 高野雅彦[2]

机构地区：[1]吉林大学第二医院眼科,长春130041 [2]日本北里大学眼科

出　　处：《眼科研究》

基　　金：长春市科技发展计划项目资助(01-112536)

年　　份：2005

卷　　号：23

期　　号：4

起止页码：400-402

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立成熟视网膜神经节细胞(RGCs)的体外三维培养模型,并应用此方法研究BDNF/GDNF对体外三维培养的成熟RGCs轴突再生的促进作用.方法取10周龄大鼠,每只鼠眼视网膜切成0.5 mm×0.5 mm大小16片.将视网膜片神经纤维层向下浸入12孔培养板的胶原溶液层中,胶原溶液凝固后,培养孔内加入无血清MEM培养液.实验组另外分别添加BDNF/GDNF 100 ng/ml.相差显微镜观察生长情况,记数每片视网膜外生神经突起数.应用羊抗鼠FITC-Thy-1.1单克隆抗体鉴定培养的神经节细胞突起.结果RGCs突起在凝胶中呈螺旋迂曲生长,无神经因子可存活2周以上,加入神经因子可存活3～4周.培养6 d后计数每片视网膜外生神经突起数,BDNF对照组和实验组分别为24.4±11.7和51.2±15.6.GDNF对照组和实验组分别为19.9±11.6和33.6±18.5.免疫组织化学荧光显色神经节细胞突起呈阳性反应.结论应用凝胶做支持物可以成功地对成熟RGCs进行三维培养,BDNF/GDNF可以明显地促进神经节细胞的神经突起再生.

关 键 词：视网膜神经节细胞 组织培养  三维培养  BDNF GDNF

分 类 号：R774.1]