文献类型：期刊文章

作　　者：曹聪[1] 董英海[1] 董宇启[1] 路丽明[2] 崔磊[2] 刘伟[2] 曹谊林[2]

机构地区：[1]上海第二医科大学附属仁济医院骨科,上海200127 [2]上海组织工程研究与开发中心

出　　处：《中国修复重建外科杂志》

基　　金：上海市科委重点攻关基金资助项目(ODJ14001-7);上海第二医科大学自然科学研究基金资助项目(2001校14);上海第二医科大学附属仁济医院重点科研资助项目~~

年　　份：2005

卷　　号：19

期　　号：8

起止页码：642-647

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立分离、培养成人外周血来源的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,观察成人血源性MSCs体外成骨潜能。方法抽取成年志愿者外周静脉血30份,每份15ml。用淋巴细胞分离液(密度为1.077g/ml)梯度离心,取单个核细胞在含有20%胎牛血清的α-MEM培养液中培养扩增MSCs,流式细胞仪分析MSCs表型。第2次传代培养时在培养液中添加成骨诱导因子(地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3)。第5代传代细胞检测碱性磷酸酶、型胶原(collagentype,Col)、骨钙素(osteocalcin,OC)和骨粘连蛋白(osteonectin,ON)表达,连续培养1个月后检测钙结节形成情况。结果成人外周血中存在MSCs,集落形成率为0.27±0.22/106单个核细胞,表达CD44、CD54、CD105和CD166,而不表达与造血系相关的CD14、CD34、CD45及内皮细胞特异的CD31。地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3可作用于传代培养的血源性MSCs,表现为碱性磷酸酶染色阳性细胞增多,逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)产物电泳条带显示ColI、OC和ON表达,盐酸四环素荧光标记证实有钙结节形成。结论建立的成人MSCs分离、培养条件可分选出外周血贴壁生长的细胞中一组独特的细胞群。成人血源性MSCs具有较强的体外成骨潜能,可望成为一种新的骨组织工程种子细胞。

关 键 词：血细胞间允质干细胞骨生成  

分 类 号：R329]