文献类型：期刊文章

作　　者：李加瑞[1] 赵伟[1,3] 李全梓[1] 叶兴国[2] 安宝燕[1] 李祥[1] 张宪省[1]

机构地区：[1]山东农业大学生命科学学院,山东省作物生物学重点实验室 [2]中国农业科学院作物育种栽培研究所,农业部作物遗传育种重点实验室 [3]中国农业科学院文献信息中心,北京100081

出　　处：《Acta Genetica Sinica》

基　　金：国家转基因专项(编号:J00-A-006);国家863项目(编号:2001AA212131)~~

年　　份：2005

卷　　号：32

期　　号：8

起止页码：846-854

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：通过RNAi策略转化小麦,以降低小麦种子中直链淀粉的含量。小麦中直链淀粉合成的关键酶是颗粒结合型淀粉合成酶(GranuleboundstarchsynthaseI,GBSSI,即WAXY蛋白),通过RTPCR方法从小麦种子中分离出Waxy基因。Southern杂交分析表明,在基因组中存在3个Waxy基因。Northern杂交分析显示出在授粉后的小麦种子中检测到WaxymRNA。利用RNA沉默策略,将Waxy编码区683bp的正向和反向片段以及150bp内含子,连接于表达载体pCAMBIA3300中玉米ubi1启动子下游。以扬麦10号授粉后15d的幼胚为外植体,利用农杆菌介导的方法进行转化。通过PCR、RTPCR和叶片离体褪绿实验鉴定出4株转基因植株。小麦胚乳I2KI染色和直链淀粉含量测定表明这4株转基因植株直链淀粉含量明显下降。研究结果表明Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子直链淀粉的含量下降。

关 键 词：小麦 WAXY RNA干涉 农杆菌介导的转化  直链淀粉

分 类 号：S512.1]