文献类型：期刊文章

作　　者：张万坡[1] 程国富[1] 谷长勤[1] 李德学[2] 宋念华[2] 毕丁仁[1] 胡薛英[1] 胡思顺[1] 胡智斌[2]

机构地区：[1]华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070 [2]湖北省动物疫病诊断中心,湖北武汉430064

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：湖北省科技攻关项目(2004AA202B04)

年　　份：2005

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：371-373

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据已知禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)核蛋白(NP)基因序列,选取其中保守区域设计出1对引物,以RT-PCR方法扩增出543bp的NP基因片段,采用地高辛标记制备探针。MDCK细胞人工感染H9N2亚型禽流感病毒后,不同时间取样制备细胞涂片,进行原位杂交,研究了禽流感病毒对MDCK细胞的感染,探讨了原位杂交的条件及其应用于检测AIV感染的可行性。结果显示,感染24h后,原位杂交可检测出细胞内的病毒RNA,并且杂交信号的强度与感染时间的长短有关。研究表明,原位杂交检测禽流感病毒,不但能很好地表现病毒和细胞的位置关系,而且具有较好的特异性和灵敏性,为禽流感病毒的组织原位杂交检测奠定了实验基础。

关 键 词：原位杂交 禽流感病毒 MDCK细胞

分 类 号：S852.65]