文献类型：期刊文章

作　　者：张志刚[1] 白德朗[1] 陈烈臣[2] 熊兴华[3] 李栒[3] 官春云[3]

机构地区：[1]国家杂交水稻工程技术研究中心,湖南长沙410125 [2]湖南农业大学期刊社,湖南长沙410128 [3]作物基因工程湖南省重点实验室,湖南长沙410128

出　　处：《湖南农业大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家"863"计划资助项目(国家生字1997-185)

年　　份：2005

卷　　号：31

期　　号：3

起止页码：249-252

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、INSPEC、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中.

关 键 词：甘蓝型油菜 PCR 反义PEP  种子特异性表达载体  

分 类 号：Q785] S565.4]