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Taqman实时荧光定量PCR快速检测白斑综合症病毒的方法研究
The methodology study on rapid detection of WSSV by taqman-based real-time PCR
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]浙江省舟山市疾病预防控制中心,浙江舟山316000 [2]浙江大学传染病研究所,杭州310031
年 份:2005
卷 号:15
期 号:6
起止页码:663-665
语 种:中文
收录情况:CAS、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的:建立一种快速、特异、灵敏的实时荧光定量PCR方法用于检测白斑综合病毒DNA,为控制对虾白斑综合症提供科学依据。方法:根据GenBank登录的白斑综合病毒株序列,使用生物学软件进行序列对比,在白斑综合症病毒保守区序列设计引物和Tagman探针并进行筛选。对实时荧光定量PCR反应条件进行优化,提高了该方法的特异性、灵敏度和重现性等,并与标准方法(核酸探针点杂交)进行比对,对现场32份虾样进行了检测。结果:Tagman实时荧光定量PCR与标准方法的特异性符合率为100%,灵敏度超过标准方法的10000~100000倍,检测时间为标准方法的1/24,重现性良好(s=0.1~0.49,CV=0.78%~3.72%),并能准确定量。结论:本研究建立的Taqman实时荧光定量PCR方法用于白斑综合症病毒检测具有特异、灵敏、快速、定量、重现性好等优点。
关 键 词:实时荧光定量PCR TAQMAN 综合症 白斑 快速检测 荧光定量PCR方法 标准方法 病毒DNA 重现性 科学依据 设计引物 反应条件 核酸探针 检测时间 特异性 灵敏度 序列 病毒株 生物学 点杂交 符合率
分 类 号:R457.12] R446.9[临床医学类]
参考文献:
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引证文献:
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