文献类型：期刊文章

作　　者：吴晓萍[1] 李校堃[2] 苏志坚[1] 郑青[1] 吴思娴[2]

机构地区：[1]暨南大学药学院,广州510632 [2]暨南大学广东省生物工程药物重点实验室,广州510632

出　　处：《中国生物工程杂志》

年　　份：2005

卷　　号：25

期　　号：5

起止页码：32-35

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：用PCR法将人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因中编码第2 5、69和92位的半胱氨酸(Cys)密码子突变为丝氨酸(Ser)密码子,将突变的hbFGFcDNA片断与表达质粒pET3c连接,构建重组质粒pET3c hbFGFSer2 5,69,92 。hbFGFSer2 5,69,92 在大肠杆菌BL2 1 (DE3)中的表达量大于30 %。通过阳离子交换和肝素亲和层析两步纯化,得到纯度大于95 %的hbFGFSer2 5,69,92 。MTT法测定纯化的产物活性表明,hbFGFSer2 5,69,92 突变体促Balb/c细胞增殖的活性与野生型hbFGF相当,为下一步对hbFGFSer2 5 ,69,92 突变体进行定点化学修饰打下了基础。

关 键 词：人碱性成纤维细胞生长因子 突变体 PCR  阳离子交换 肝素亲和层析  生物学活性 化学修饰 蛋白质类药物

分 类 号：R977.6]