文献类型：期刊文章

作　　者：许黎美[1] 万秋红[2] 王丁[1]

机构地区：[1]中国科学院水生生物研究所 [2]浙江大学濒危野生动物保护遗传与繁殖教育部重点实验室,杭州310029

出　　处：《水生生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(30170142);中国科学院重要创新方向项目(KSCX2-SW-118);中国科学院创新领域前沿项目(220103)资助。

年　　份：2005

卷　　号：29

期　　号：3

起止页码：272-278

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：福尔马林固定标本是宝贵的遗传资源,但是如何有效利用其中的遗传信息一直存在问题。本文尝试从标本预处理、消化、PCR扩增各方面综合考虑和优化改进,成功提取并扩增21头福尔马林固定白豚标本线粒体DNA控制区410bp片段。采用了3种预处理方法尽量去除固定标本中残存的甲醛,从试验结果来看,从酒精梯度+临界点干燥处理的标本中提取的DNA在扩增时具有明显优势。通过蛋白酶K消化过程中对于酶的浓度、温浴时间的比较试验,发现随着采用大幅提高酶浓度、延长消化时间等高强度的蛋白酶消化操作后,DNA的质量和产量均得到显著提高。针对标本DNA降解严重的特点,设计特异性好且长度合适的引物以及使用巢式引物扩增,均提高了标本DNA扩增的特异性和灵敏度。通过对所测得的21头白鱀豚线粒体DNA控制区部分序列的对比,发现全部个体在该片段上的序列完全一致,说明白豚遗传多样性极低。

关 键 词：福尔马林固定标本  DNA提取 白暨豚 遗传多样性  极度濒危物种  

分 类 号：Q959.841]