文献类型：期刊文章

作　　者：谢运海[1] 夏德安[1] 姜静[1] 林萍[2]

机构地区：[1]东北林业大学林学院,哈尔滨150040 [2]黑龙江省林业科学院,哈尔滨150040

出　　处：《分子植物育种》

基　　金：国家十五攻关课题,北方主要珍贵阔叶用材树种优良品种选育及培育技术——子课题水曲柳良种选育技术(2002BA515B0502)基金项目资助。

年　　份：2005

卷　　号：3

期　　号：3

起止页码：445-450

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：利用正交设计L16(45)对水曲柳ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件MINITAB分析:①各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;②筛选出各反应因素的最佳水平,建立水曲柳ISSR-PCR反应的最佳体系(20滋l)为:Taq酶1.0U,Mg2+2.0mmol/L,模板DNA50￣200ng,dNTP0.15mmol/L,引物0.3滋mol/L。最后,对水曲柳ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火,得到最佳退火温度为58.3℃。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术,研究水曲柳的地理变异提供一个标准化程序。

关 键 词：PCR反应体系 水曲柳 设计优化  ISSR-PCR  ISSR标记技术  MINITAB  MG^2+ Taq酶  最佳反应体系 模板DNA  标准化程序  正交设计  DNTP 优化试验  统计软件  退火温度  优化系统  地理变异  水平  mol  引物  果用  

分 类 号：S792.41]