文献类型：期刊文章

作　　者：张少恩[1] 孙晗笑[1] 张光[1] 杨清玲[1] 沙文琼[1] 刘俊云[1] 龚莉桂[1]

机构地区：[1]暨南大学药学院基因组药物研究所,广州510632

出　　处：《中国生物制品学杂志》

基　　金：国家"八六三"计划项目(No.2003AA219060);国家自然科学基金(No.30170881);广东省重点科技攻关计划项目(No.2002A1090211).

年　　份：2005

卷　　号：18

期　　号：3

起止页码：247-251

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的纯化、复性大肠杆菌表达的vMIPⅡ包涵体蛋白。方法用8molL尿素缓冲液变性溶解vMIPⅡ包涵体,然后加入十二烷基磺酸钠(SDS)进一步促溶,利用金属亲和层析和分子筛层析纯化,再利用柱层析去除SDS,纯化后透析复性;通过荧光和单核淋巴细胞趋化抑制实验检测复性蛋白的结构和抑制单核淋巴细胞趋化的活性。结果重组vMIPⅡ纯化和复性后,仍具有完整的高级结构和抑制单核细胞趋化的活性。结论已获得了重组vMIPⅡ活性蛋白,为进一步研究应用奠定基础。

关 键 词：大肠杆菌表达 复性 十二烷基磺酸钠  淋巴细胞  包涵体蛋白 层析纯化 亲和层析  实验检测  单核细胞  高级结构  活性蛋白 缓冲液  分子筛  SDS  柱层析  再利用  趋化 抑制  重组  

分 类 号：Q78] O647.2]