文献类型：期刊文章

作　　者：高凯[1] 赵爱志[2] 吴小兵[2] 药力波[1] 张英起[1] 王军志[1]

机构地区：[1]中国人民解放军第四军医大学研究生院,陕西西安730000 [2]国家863计划生物领域病毒基因载体研发基地,北京100176

出　　处：《苏州大学学报（医学版）》

基　　金：国家 8 63高技术研究发展计划资助项目 (2 0 0 3AA2Z3 480 ;2 0 0 4AA2 170 40 )

年　　份：2005

卷　　号：25

期　　号：2

起止页码：182-185

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、IC、核心刊

摘　　要：目的　构建携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR :Fc) ,并对该病毒在Lewis大鼠体内的表达和生物学活性进行初步研究,探讨以该重组腺相关病毒载体应用于类风湿关节炎基因治疗的可行性。方法　首先以RT- PCR分别从大鼠脾细胞和大鼠淋巴细胞总RNA中扩增出大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二者融合后克隆入pSNAVⅠ载体质粒进行重组病毒生产。在获得重组病毒后于Lewis大鼠肌肉注射,于不同时间ELISA测定血清ratTNFR :Fc表达,并以TNF -α细胞毒中和实验测定重组病毒表达产物的生物学活性。结果　所构建的重组病毒rAAVⅠ/ratTNFR :Fc基因结构与预期一致;病毒于Lewis大鼠肌肉注射后可表达ratTNFR :Fc蛋白,含有ratTNFR :Fc蛋白的血清可以有效中和大鼠TNF- α对L92 9细胞的杀伤作用。结论　本研究所构建的携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR :Fc)可以用来作为阻断TNF α的手段于大鼠类风湿关节炎模型上进行基因治疗研究。

关 键 词：腺相关病毒 基因治疗  肿瘤坏死因子 类风湿关节炎  

分 类 号：R593.22]