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荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨
A Sensitive and Convenient Fluorescence Assay for the Determination of Cytotoxic T Lymphocyte Activity Primed by HBsAg
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]厦门大学福建省医学分子病毒学研究中心,福建厦门361005
基 金:教育部跨世纪人才优秀培养计划
年 份:2005
卷 号:21
期 号:2
起止页码:113-117
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定CalceinAM荧光素标记法的最佳条件。用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb/c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E/T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65%。通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。
关 键 词:CTL 乙型肝炎病毒表面抗原 T淋巴细胞 特异性杀伤 靶细胞 荧光素标记 培养上清 浓度 孵育 洗涤次数
分 类 号:Q783.1] R735.7]
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