文献类型：期刊文章

作　　者：张述[1] 王革非[1] 王贞慧[1] 张裕平[1] 吴海祥[1] 熊春发[1] 余永恒[1]

机构地区：[1]丝宝集团科研中心生命科学研究所,武汉430056

出　　处：《中国生物制品学杂志》

年　　份：2005

卷　　号：18

期　　号：2

起止页码：117-119

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的　构建重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株 ,并对表达产物进行评价。方法　由外周血白细胞总RNA经RT- PCR克隆获得HLF基因结构cDNA ,测序后克隆入酵母表达载体获得质粒pPIC9K- HLF ,线性化后电转化入毕赤酵母 ,经G4 -18 YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达。结果　获得基因与GenBank中的人HLF0 1基因基本相符。 2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体反应 ,具有抑制大肠杆菌生长的作用。结论　获得了能分泌有活性HLF的重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株。

关 键 词：分泌表达 外周血白细胞 人乳铁蛋白 菌株  克隆 抗体反应 RT-PCR  毕赤酵母  诱导表达  电转化

分 类 号：Q786] Q78