文献类型：期刊文章

作　　者：黄圣兵[1] 宋玮[1] 林其谁[1]

机构地区：[1]中国科学院上海生命科学研究院 生物化学与细胞生物学研究所 分子细胞生物学重点实验室,上海200031

出　　处：《中国科学（C辑）》

基　　金：中国科学院知识创新经费资助项目

年　　份：2005

卷　　号：35

期　　号：1

起止页码：77-86

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD2011_2012、核心刊

摘　　要：从大鼠肝线粒体纯化得到一个内膜结合蛋白,经蛋白酶水解发现丰度最高的两个肽段含有相同的一个14肽序列.BLAST同源搜索找到了与这个14肽对应的大鼠基因组DNA.利用RACE的方法得到一个完整开放阅读框的cDNA,编码含616个氨基酸残基的蛋白质序列.克隆得到的大鼠cDNA与人的ETF-QO具有很高的同源性.通过序列比较发现克隆得到的cDNA对应大鼠ETF-QO的蛋白前体ETF-QOp,而从大鼠肝线粒体纯化得到的内膜结合蛋白则是ETF—QO. 构建的pYES/ETF—QO在酵母中的表达产物富集于线粒体组分,并具有ETF—QO的氧化-还原活性, 因此获得了ETF-QO在酵母中的功能表达,表明ETF—QOpN端32肽是线粒体的引导肽,且FAD 及[4Fe-4S]被正确地组装.ETF—QO在大鼠的心、肝、肾表达较高,而在脾与肺却很低.在动物细胞中表达了ETF—QOp的GFP融合蛋白,它在细胞内与线粒体的特异染料呈共定位.

关 键 词：大鼠  内膜  鼠肝 醌氧化还原酶  肝线粒体 表达  结合蛋白  动物细胞 克隆 泛醌

分 类 号：Q78] R394]