文献类型：期刊文章

作　　者：顾奇伟[1] 林建国[1] 王芳[1] 张传溪[1]

机构地区：[1]浙江大学应用昆虫研究所分子生物学实验室,杭州310029

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.30070032);高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金(No.200055)资助

年　　份：2005

卷　　号：13

期　　号：1

起止页码：96-101

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：用PCR方法分别扩增出BmNPV几丁质酶基因编码区全片段和去信号肽片段。将全片段克隆入原核表达载体pET28a,在大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3)进行融合表达。将去信号肽片段克隆入pFastBacb转移载体,重组到杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,在粉纹夜蛾(Trichoplusiani)细胞系(Tn-5B1-4)中进行融合表达。SDS-PAGE分析和薄层扫描显示,2片段均得到高效表达,表达产物分别占细胞总蛋白的22%和12%。将以上2种表达产物加入Bt菌液中喂食2龄家蚕(Bombyxmori),观察并记录不同处理下家蚕的死亡时间及体重。结果表明,2种表达产物对Bt杀虫剂均有明显的增效作用。取食添加以上2种表达产物的家蚕与对照处理相比,LT50分别提前24.5和24.6h,体重增量约是对照组的1/4。

关 键 词：表达产物  融合表达  对照组  处理  薄层扫描 ET 体重  BT杀虫剂 家蚕 增效作用  

分 类 号：S482] S436.3]