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重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽在大肠杆菌中的表达及其诱导成骨活性
Expression of Recombinant Mature Peptide of Human Bone Morphogenetic Protein-2 in Escharichia coil and Its Activity of Bone Formation
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]军事医学科学院基础医学研究所
年 份:1994
卷 号:10
期 号:3
起止页码:319-324
语 种:中文
收录情况:CSCD、CSCD2011_2012、普通刊
摘 要:报告了人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)成熟肽的基因克隆,及其在大肠杆菌中的表达。用AflⅡ酶剪除BMP-2cDNA中的信号肽及前肽部分的序列,将编码成熟肽的cDNA3′端0.36kb基因片段克隆于大肠杆菌表达载体pMX-1质粒的ATG下游,受控于PLPR启动子。重组子以大肠杆菌DH5α为宿主细胞进行温度诱导表达。工程菌经42℃6h诱导后,在SDS-PAGE上出现一条新蛋白带,分子量约为12kD,约占菌体总蛋白的20%。主要以包涵体形式存在的表达产物经初步纯化后,可获得纯度较高的重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽(rhBMP-2m)。小鼠肌肉植入试验发现。rhBMP-2m植入后的不同时间,在局部出现间质细胞的聚集和增生、软骨细胞及软骨基质的生成和硬质骨的形成,证明rhBMP-2m具有明显的诱导新骨形成的作用。
关 键 词:人 骨形态发生 蛋白 DNA 重组 表达
分 类 号:Q593.9]
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