文献类型：期刊文章

作　　者：赵永波[1] 张莹[2] 王枫[2] 关振中[2] 李钰[3] 张贵寅[3]

机构地区：[1]上海市第一人民医院神经科,复旦大学市一临床医学院200080 [2]哈尔滨医科大学附属第二医院 [3]哈尔滨医科大学基础医学院医学遗传学研究室

出　　处：《神经疾病与精神卫生》

基　　金：国家自然科学基金资助项目

年　　份：2001

卷　　号：1

期　　号：4

起止页码：14-18

语　　种：中文

收录情况：ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的 建立稳定表达人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)的细胞系。方法将t-PA的反义DNA(t-PA cDNA)连接在真核表达载体pcDNA3.1(+)的Kpn I和Xba I酶切位点上,构建成重组质粒pcDNA3.1(+)t PA。用FuGENE6介导法转入人类AGZY83-a细胞系中,经G418筛选形成阳性克隆,接种于培养基中培养,检测表达产物。结果 各种酶切图谱及筛选后单克隆形成,证明tPA cDNA已正确组装在载体上,培养液中rt-PA的含量高于对照组且可持续12周,表明pcDNA3.1(+)tPA已可在AGZY83-a细胞中得到表达。结论 转染tPA cDNA的AGZY83-a细胞已可稳定表达人类tPA,为血栓性疾病的基因治疗奠定了一定的基础。

关 键 词：RT-PA 稳定表达  细胞系  PCDNA3 对照组  反义DNA 血栓性疾病 证明  结论  构建  

分 类 号：R346[基础医学类]