文献类型：期刊文章

作　　者：王天云[1] 侯卫红[1] 袁保梅[1] 柴玉荣[1] 侯桂琴[1] 王建民[1] 薛乐勋[1]

机构地区：[1]郑州大学细胞生物学研究室

出　　处：《实验生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(No:30270031)"863"高科技计划项目(No.2002AA628050)资助

年　　份：2005

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：23-28

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD2011_2012、JST、核心刊

摘　　要：核基质附着区(Matrixattachmentregion,MAR)是一段与核基质结合的DNA序列。为分离杜氏盐藻核基质附着区,我们首次构建了杜氏盐藻MAR文库。首先用0.5%TritonX-100裂解细胞,经30%和70%Percoll不连续梯度离心分离盐藻细胞核,再用二碘水杨酸锂(lithiumdiiodosalicy-late,LIS)去除组蛋白和限制酶消化除去结合松弛的DNA片段,最后通过蛋白酶K消化和乙醇沉淀提取盐藻核基质DNA。采用4种限制酶酶切,T_4DNA连接酶连至用相应限制酶酶切的pUC18载体上,转化E.coliJM109感受态细胞,挑选阳性克隆,构建MAR文库。部分测序分析表明,克隆的DNA片段具有明显的MAR特征。为进一步研究MAR对基因表达的调控作用及其作用机制提供了基础。

关 键 词：MAR 杜氏盐藻 核基质 文库  DNA片段 阳性克隆 组蛋白  首次  UC  酶消化

分 类 号：Q943.2[植物生产类]