文献类型：期刊文章

作　　者：高波[1] 刘志刚[1] 邢苗[1] 徐宏[2] 罗时文[2] 赖仞[2]

机构地区：[1]深圳大学生命科学学院,深圳518060 [2]深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳518060

出　　处：《昆虫学报》

基　　金：国家自然科学基金项目 (3 9660 0 73 );广东省科技重点项目 (2 0 0 3A3 0 80 5 0 2 );深圳市科技计划资助项目

年　　份：2005

卷　　号：48

期　　号：1

起止页码：13-17

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以阳性噬菌体克隆为模板 ,通过PCR扩增出目的基因片段并克隆入T载体 ,经测序证实为美洲大蠊Periplanetaamericana变应原CrPI后 ,将该基因亚克隆入表达载体pGEX 5X 1。美洲大蠊变应原CrPI在大肠杆菌中得到高效表达 ,但主要以包涵体形式存在于沉淀中。目的蛋白溶于 6mol L盐酸胍并经稀释复性后 ,经GlutathioneSepharoseTM 4B亲和层析 ,纯度达 90 %以上。以蟑螂过敏病人血清进行免疫印迹检测 ,结果显示重组变应原具有良好的IgE结合活性。

关 键 词：美洲大蠊 重组变应原Cr  PI 蛋白表达 亲和层析  免疫印迹

分 类 号：Q966]