文献类型：期刊文章

作　　者：马道新[1] 纪春岩[1] 赵建强[2] 郭农建[2] 张茂宏[1] 于书彦[3]

机构地区：[1]山东大学齐鲁医院血液学研究室 [2]济南市中心医院 [3]山东大学生理学研究所,济南250012

出　　处：《基础医学与临床》

基　　金：山东省医药卫生资助项目 (2 0 0 1CA1CJA1) ;山东省科技发展计划资助项目 (2 0 0 1BB1CJB1)

年　　份：2004

卷　　号：24

期　　号：6

起止页码：651-656

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CSCD、CSCD2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：Notch信号传导系统在介导造血细胞增殖与分化过程中具有重要作用。通过分子克隆技术成功构建含标记基因FLAG的Notch配基Delta4的高表达载体pTracer CMV Delta4 FLAG ,瞬时转染COS7细胞 ,4 8h后收获细胞并制备融合蛋白 ,SDS PAGE凝胶电泳和Western blot证实后 ,将其稳定转染CHO细胞 ,Western blot鉴定并筛选高表达Delta4的Delta4 CHO1 4及Delta4 CHO1 5细胞株 ,利用Luciferase分析方法进行Delta4功能性研究。研究结果发现Delta4对Notch1及Notch2均具有信号功能活性 ,且对后者的活性功能水平大于前者 ,说明Delta4为Notch1及Notch2的配基。与其他配基功能比较 :对Notch1,Delta4的功能活性高于Delta1及Jagged1,但略低于Jagged2 ;对Notch2 ,Delta4的功能活性低于Delta1、Jagged1及Jagged2 ,但亦具有较强的活性水平。

关 键 词：高表达  NOTCH基因 功能活性  配基  WESTERN-BLOT NOTCH信号 分子克隆技术 COS7细胞 CHO细胞 凝胶电泳  

分 类 号：Q78]