期刊文章详细信息
东方田鼠特异DNA片段的克隆及核苷酸序列分析
The Cloning of Specific DNA Fragment in Microtus Fortis and Its Nucleotide Sequencing
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙410078
基 金:国家科技部"九五"国家科技攻关项目! (96 A2 3 0 6 0 4 ) ;湖南省科技厅"九五"科技攻关配套基金;国家自然科学基金!(3 0 0 70 4
年 份:2001
卷 号:9
期 号:2
起止页码:67-72
语 种:中文
收录情况:CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的 获得东方田鼠的特异DNA序列。方法 Aβ基因使用PCR ,基因克隆 ,斑点杂交 ,DNA序列分析 ,生物信息学技术。结果 根据小鼠MHCⅡ外显子 2及其两侧序列 ,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、测序后 ,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA ,其中一对引物可得到特异性扩增带 ,将得到的DNA片段插入PGEM Teasy载体 ,进行序列分析。用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB c小鼠及C57BL 6J小鼠基因组DNA ,均无扩增产物。以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交 ,除东方田鼠基因组DNA外 ,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果。进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测 ,在Genbank中没有发现高度同源序列 ,并且找到一个可能的外显子 ,该外显子由 69个氨基酸组成。结论 获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段 ,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础。
关 键 词:东方田鼠 扩增 外显子 DNA片段 斑点杂交 引物 特异性 基因组DNA 动物基因组 生物进化
分 类 号:Q78] R383.24]
参考文献:
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