文献类型：期刊文章

作　　者：王涛[1] 陈建平[1] 郅克谦[2] 陶大昌[3] 杨春蕾[4] 张雷[5]

机构地区：[1]四川大学华西医学中心基础医学与法医学院寄生虫学教研室,成都610041 [2]西安交通大学口腔医学院颌面外科,西安710004 [3]四川大学华西医院,成都610041 [4]四川大学生命科学院医学细胞生物学教研室,成都610041 [5]大理学院微生物学教研室,大理671000

出　　处：《生物化学与生物物理进展》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(3 0 3 0 0 3 0 2)~~

年　　份：2004

卷　　号：31

期　　号：9

起止页码：818-823

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、SCI(收录号：WOS:000224052600009)、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000224052600009)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3 1( +),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3 1 mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和蛋白质印迹鉴定瞬时表达和稳定表达产物,结果发现:重组质粒成功转入细胞并获得短暂表达,稳定转染细胞分别在 2 4ku和 35ku处检测到阳性杂交信号.将pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFN γ产生水平、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等体液免疫和细胞免疫反应的指标,评价疫苗的免疫原性.结果发现:各实验组均检测到免疫原性,pcDNA3 1 mip/ctxB免疫组的免疫原性高于pcDNA3 1 mip免疫组,有显著性差异(P <0 0 1).

关 键 词：嗜肺军团菌 霍乱弧菌 mip/ctxB融合基因  体外表达 免疫原性

分 类 号：R389]