文献类型：期刊文章

作　　者：张清健[1] 黄天华[1] 谢庆东[1] 曾丽萍[2]

机构地区：[1]汕头大学医学院生殖医学研究中心 [2]汕头大学医学院第一附属医院妇产科,广东汕头515041

出　　处：《癌变．畸变．突变》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.39970374)

年　　份：2004

卷　　号：16

期　　号：6

起止页码：324-327

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：背景与目的:乙型肝炎是危害人类健康的全球性疾病。为了探索乙肝病毒通过卵母细胞垂直传递的可能性,对HBV DNA重组质粒能否转染小鼠卵母细胞进行了研究。 材料与方法:将小鼠卵母细胞与pBR322-HBV DNA重组质粒进行共培养后,分别提取卵母细胞DNA及制备小鼠卵母细胞中期染色体。用PCR、Southern、斑点杂交及FISH技术证实HBV DNA能否转染小鼠卵母细胞。结果:PCR试验在受检样本中观察到HBV DNA阳性条带。Southern试验在受检PCR产物中观察到明显的阳性杂交信号。用每次实验的最后3次洗液进行斑点杂交未发现HBV DNA阳性信号,排除了PCR和Southern阳性结果来自洗液污染的可能性。荧光原位杂交在1000个卵母细胞中的36个中期相内发现HBV DNA杂交信号。结论:HBV DNA序列能够通过卵母细胞的透明带和细胞膜,进入卵母细胞内并整合到卵母细胞染色体上。此类卵母细胞与正常精子受精时,有可能作为载体将HBVDNA带进胚胎。

关 键 词：HBV DNA  转染 小鼠  卵母细胞 整合  染色体

分 类 号：R512.62]