文献类型：期刊文章

作　　者：秦洁[1] 曹孟德[2] 许予明[1] 邢莹[2] 陈宗德[3] 鄢文海[2] 韩雪飞[2] 许燕[2] 龚光明[2]

机构地区：[1]郑州大学第一附属医院神经内科,郑州450052 [2]郑州大学医学院干细胞研究中心,郑州450052 [3]郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州450052

出　　处：《郑州大学学报（医学版）》

基　　金：河南省科技攻关资助项目 981170 2 2 7;河南省科技攻关重点资助项目 0 2 2 463 0 174;河南省医学科技创新人才工程资助项目 2 0 0 2 2 0 7

年　　份：2004

卷　　号：39

期　　号：6

起止页码：956-960

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :检测重组人表皮生长因子 (EGF)和碱性成纤维生长因子 (bFGF)联合诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化过程中端粒酶活性的变化 ,以探讨人脐血MSCs的增殖性和安全性 ,为其临床应用提供实验和理论依据。方法 :采集健康自然分娩产妇志愿捐献的脐血 ,密度梯度离心分离单个核细胞 ,接种于含体积分数为2 0 %胎牛血清的DMEM/F12中 ,对照组不加细胞因子 ,实验组加入EGF和bFGF ,终浓度均为 10 μg/L ,剩余细胞用液氮冻存。培养 2 4h后倾去全部液体以去除未贴壁细胞 ,以后每 3d全量换液 1次。分别收集培养 1d、4d、7d、10d、14d、2 1d的贴壁细胞和冻存细胞 ,将细胞密度调整一致 ,采用反转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)方法检测脐血MSCs培养前后各时间段的巢蛋白 (nestin)和神经丝亚单位M(NF -M)mRNA表达 ;采用端粒重复序列扩增 -酶联免疫吸附实验 (TRAP -ELISA)法检测人脐血MSCs向神经细胞分化过程中的端粒酶活性变化。结果 :RT -PCR检测发现 ,未培养的脐血细胞nestin、NF -MmRNA均呈阳性表达 ;培养后NF -MmRNA的表达随培养时间延长而增强(P <0 .0 1) ;实验组与对照组相比 ,细胞因子能明显促进NF -MmRNA的表达 (P <0 .0 1)。而nestinmRNA的表达随培养时间延长而下降 (P <0 .0 1) ,至第 7d已不能检出 ;

关 键 词：脐血 间充质干细胞  神经分化 端粒酶

分 类 号：R331]