期刊文章详细信息
琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法
New and Simple Method for Recovery of Trace DNA Fragments from Normal Agarose Gel
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中南民族大学化学与生命科学学院生物技术国家民委重点实验室,武汉430074 [2]武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉430072
基 金:国家 973计划项目 (2 0 0 1 CB1 0 880 6 );湖北省重点科技研究资助项目 (992 T0 4 0 7)
年 份:2004
卷 号:23
期 号:1
起止页码:10-14
语 种:中文
收录情况:AJ、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊
摘 要:对现有的 DNA片段回收方法进行了改进 .琼脂糖凝胶中目的 DNA片段条带切割后 ,浸入适量的 TE溶液 (0 .2~ 0 .4 m L/ g琼脂糖胶 ) ,在 37℃水浴保温 1 5 min,以溶出凝胶中的 DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原 PCR反应相同条件下的 PCR扩增 ,直接用 75 %乙醇沉淀后 ,适量 TE溶解得到回收的目的DNA样品 .此法回收的 DNA片段可用于分子克隆 ,特别是适用于 TA载体的克隆与测序 ,适合大批量微量样品的准确回收 ,防止了因试剂盒回收造成的微量
关 键 词:琼脂糖凝胶电泳 DNA片段回收 正交实验法 聚合酶链式反应
分 类 号:Q341]
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