文献类型：期刊文章

作　　者：管晓翔[1] 陈龙邦[1] 张爱华[2] 王靖华[1] 德伟[3]

机构地区：[1]南京军区南京总医院肿瘤科,江苏省南京市210002 [2]南京医科大学儿童肾脏病研究中心,江苏省南京市210002 [3]南京医科大学分子与生物化学中心,江苏省南京市210002

出　　处：《世界华人消化杂志》

基　　金：中国博士后科学基金资助项目;No.2003034383~~

年　　份：2004

卷　　号：12

期　　号：9

起止页码：2041-2044

语　　种：中文

收录情况：CAS、EMBASE、IC、SCOPUS、外刊、普通刊

摘　　要：目的:p27kip1氨基端第10号位置的丝氨酸(Ser10)磷酸化位点是该蛋白分子中最重要的磷酸化位点,探讨人工诱变该位点丝氨酸为丙氨酸(S10A)后对肝癌细胞株HepG2细胞周期以及细胞增生的影响.同时比较野生型p27kip1和Ser10突变型p27kip1基因转染对肝癌细胞株HepG2细胞周期和增生的影响. 方法:应用脂质体转染法将含人野生型和突变型p27kip1质粒DNA瞬时转染HepG2细胞,免疫细胞化学检测p27kip1蛋白的表达和细胞内分布,流式细胞计数仪分析细胞周期变化. 结果:野生型和突变p27kip1蛋白转基因后HepG2细胞均可以G0期阻滞,且突变型的阻滞作用强于野生型(P<0.05),细胞生长受到抑制.无血清培养96 h同步化于G0期,野生型和突变型p27kip1均分布于细胞核;而在20mL/L血清继续培养8 h后野生型向细胞质转运而主要分布于细胞质, 突变型仍然滞留于细胞核. 结论:p27kip1的过度表达可明显抑制HepG2细胞的增生, p27kip1Ser10磷酸可能介导其细胞核外转运的重要分子机制.

关 键 词：HepG2细胞  突变型  增生  野生型  肝癌细胞株 抑癌基因 细胞周期 细胞核  突变体 蛋白分子  

分 类 号：R735.7]