文献类型：期刊文章

作　　者：林仁勇[1] 丁剑冰[1] 卢晓梅[1] 王笑峰[1] 阿孜古丽[1] 魏晓丽[2] 王俨[1] 温浩[1]

机构地区：[1]新疆医科大学第一附属医院 [2]新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,乌鲁木齐830054

出　　处：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》

基　　金：国家自然科学基金 (No 30 1 60 0 81 );新疆科技厅基金(No 2 0 0 2 2 1 1 0 1 )~~

年　　份：2004

卷　　号：22

期　　号：4

起止页码：204-208

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的　检测细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗 (pcDNA3 Eg95 )体外瞬时表达 ,探讨其诱导小鼠的体液和细胞免疫效果。　方法　pcDNA3 Eg95经脂质体转染HeLa细胞瞬时表达。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测Eg95抗原信使RNA (mRNA)在HeLa细胞中的表达 ,酶联免疫吸附测定 (ELISA)和蛋白质印迹法 (Westernblot ting)检测Eg95蛋白的瞬时表达情况。pcDNA3 Eg95基因疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠 ,ELISA检测IgG和IgG2a水平 ,四甲基偶氮唑盐试验 (MTT法 )检测免疫小鼠T淋巴细胞增殖反应。　结果　RT PCR检测结果显示 ,pcD NA3 Eg95瞬时表达组有Eg95抗原基因mRNA表达 ,ELISA和Westernblotting检测结果表明 ,可在HeLa细胞中特异性表达Eg95蛋白。用 pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫BALB/c小鼠 ,第 3周出现特异性IgG免疫应答 ,持续升高至第 10周 ,显著高于对照组。从第 2周开始 ,小鼠血清IgG2a应答即为阳性 ,且长时间 (至第 10周 )维持较高水平 ,与 pcD NA3空质粒组比较 ,其差异具有非常显著性意义 (P <0 0 1)。用原核表达的Eg95重组蛋白刺激免疫小鼠脾细胞 ,有明显的T细胞增殖反应。pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫组刺激指数明显高于pcDNA3空质粒组 (P <0 0 1)。结论　pcDNA3 Eg95基因疫苗可诱发小鼠产生特异的体液免疫和细?

关 键 词：免疫小鼠  PCDNA3 瞬时表达  抗原基因  体外 基因疫苗 细粒棘球绦虫 白刺 RT-PCR检测 诱导  

分 类 号：R392] R512[基础医学类]