期刊文章详细信息
同源重组构建表皮葡萄球菌附属基因调节子(agr)阴性突变株
Construction of Staphylococcus epidermidis agr deletion mutant via homologou s recombination
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]复旦大学附属华山医院检验医学中心,上海200040 [2]复旦大学医学院医学分子病毒学实验室
基 金:十五"2 11"工程重点学科建设项目
年 份:2004
卷 号:24
期 号:9
起止页码:728-732
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的 构建表皮葡萄球菌agr阴性突变株 ,以期得到除agr基因以外相同遗传背景的突变株与野生株。方法 首先构建同源重组质粒pBT2 △agr,后电转入金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0 ,再转入表皮葡萄球菌 32 98。通过pBT2载体对温度敏感的特点 ,含重组质粒的表皮葡萄球菌 32 98在 4 0℃多次传代 ,最终筛选出agr阴性的突变株。结果 同源重组质粒pBT2 △agr通过酶切鉴定证明构建成功 ,表皮葡萄球菌 32 98接受来自金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0的重组质粒 ,经酶切鉴定正确。 4 0℃多次传代后 ,经抗生素抗性筛选 ,并经斑点杂交及序列分析 ,证明获得表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株。结论 用同源重组的方法完成表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株的构建 ,使agr基因被大部分剔除掉。
关 键 词:表皮葡萄球菌 阴性 基因调节 金黄色葡萄球菌 重组质粒 突变株 同源重组 8-ag r基因 酶切
分 类 号:R346[基础医学类]
参考文献:
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