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期刊文章详细信息

大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA的克隆与表达    

Cloning and Expression of Pituitary Prolactin Gene in Ailuropoda melanoleuca

  

文献类型:期刊文章

作  者:郑旭[1] 张志和[1] 胡细连[1] 廖鸣娟[1] 张安居[2] 朱睦元[1]

机构地区:[1]浙江大学生命科学学院遗传学研究所,杭州310012 [2]成都大熊猫繁育研究基地

出  处:《Acta Genetica Sinica》

基  金:国家自然科学基金;成都大熊猫繁育研究基金会资助项目;Oakland -China野生动物保护基金项目资助

年  份:2004

卷  号:31

期  号:9

起止页码:963-969

语  种:中文

收录情况:AJ、BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘  要:从大熊猫脑垂体中提取总RNA ,利用RT PCR技术 ,首次扩增出大熊猫垂体泌乳素 (PRL)cDNA序列 (GenBank登录号 :AY16 12 85 )。结果表明 ,大熊猫PRLcDNA的开放阅读框为 6 87bp ,编码含 2 2 9个氨基酸残基的前体蛋白。将克隆的PRLcDNA片段构建到表达质粒pGEX 4T 1中 ,转化大肠杆菌BL2 1,在异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)的诱导下表达PRL蛋白。SDS PAGE电泳结果表明 ,表达的PRL蛋白为不可溶蛋白。蛋白质同源性比较显示 ,大熊猫与猪、猫的同源性大于 95 % ,与人、牛、山羊的在 70 %~ 80 %之间 ,与小鼠、大鼠的分别为 4 5 9%和 5 2 %。大熊猫aa64为丝氨酸 ,是亲水性氨基酸 ;而猫、牛、山羊 (脯氨酸 )和人 (丙氨酸 )aa64是疏水性氨基酸。在二级结构上 ,aa64在第一α螺旋与第二α螺旋之间 ,极性的差别可能导致蛋白空间结构的不同。

关 键 词:大熊猫 垂体泌乳素 CDNA克隆 表达  

分 类 号:Q785]

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