文献类型：期刊文章

作　　者：徐颖[1] 朱成钢[1] 金勇丰[1] 张耀洲[2]

机构地区：[1]浙江大学生物化学研究所,杭州310029 [2]浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018

出　　处：《科学通报》

年　　份：2004

卷　　号：49

期　　号：11

起止页码：1073-1078

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EI、IC、JST、MR、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以BmNPV复制必需的DNA解旋酶基因和DNA聚合酶基因为靶序列，人工设计并合成了长度分别为435(Ap1)，300(Ap2)和399bp(AH)的dsRNAs，利用TransMessenger^TM Transfection Reagent转染家蚕细胞，研究其对BmNPV复制的抑制效果．结果表明，在野生型病毒BmNPV感染家蚕细胞实验中，Ap2和AH这2个dsRNA能够有效地抑制病毒DNA的复制，并且在转染dsRNA后第4天抑制效果最佳，它们使病毒滴度(PFU／mL值)降低了10^3～10^4，而另外的dsRNA(Ap1)没有明显的抑制效果．RT—PCR和DNA斑点杂交也证实了2种目的基因的表达水平和病毒DNA的量发生了明显的下调．此外，用荧光显微镜观察dsRNA在细胞内的定位，发现在转染24h后dsRNA开始在细胞核的周围呈不连续的聚集状态。

关 键 词：BMNPV RNAI DSRNA 复制  抑制  家蚕核多角体病毒

分 类 号：S884]