文献类型：期刊文章

作　　者：冯长根[1] 陈嫚[1] 任启生[2] 宋新荣[2]

机构地区：[1]北京理工大学新医药开发研究中心,北京100081 [2]北京江中泽生科技有限责任公司,北京100050

出　　处：《中国药学杂志》

年　　份：2004

卷　　号：39

期　　号：7

起止页码：550-552

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EI(收录号：2004428405250)、EMBASE、IC、IPA、JST、PUBMED、RCCSE、RSC、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 获得具有高纯度、高生物活性的重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体(瑞替普酶,reteplase,r-PA)。方法 reteplase基因克隆到表达质粒pJZ-100中,转化Escherichia cli B121(DE3),在0.05 mmol·L-1异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下获得高效表达,表达产物通过脉冲稀释法复性,复性后的蛋白质用ETI-Sepharose 4B亲和色谱纯化。结果 表达产物占菌体总蛋白质的20％,脉冲稀释法复性后复性收率为28％,经纯化后纯度达96％以上,比活为580 000 IU·mg-1。结论 建立了reteplase表达、复性与纯化工艺,以此工艺可获得高活性高纯度的reteplase。

关 键 词：重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体  表达  复性 纯化

分 类 号：Q814[生物工程类]