文献类型：期刊文章

作　　者：华进联[1] 窦忠英[1] 徐小明[1] 李松[1] 杨玉艾[1] 雷安民[1]

机构地区：[1]西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西杨凌712100

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.30200137;39570363);国家重点基础研究发展规划(973)(No.G199954301);国家高技术研究发展计划(863)(No.2002AA216161)基金资助

年　　份：2004

卷　　号：12

期　　号：3

起止页码：294-299

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：探讨胚龄培养液、细胞因子、饲养层细胞等因素对人类胚胎生殖细胞分离克隆的影响。以4～13周龄流产胎儿生殖嵴或性腺为材料，小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、人胎儿成纤维细胞(hEF)、STO细胞和牛胎儿成纤维细胞(bEF)作饲养层，高糖DMEM(Dulbecco's minimum Eagle’s medium)为基础培养液，添加10^-4mol／L 2Me(2-巯基乙醇)、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、白血病抑制因子(LIF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、干细胞冈子(SCF)等为培养液，探讨影响人类胚胎生殖细胞分离克隆的因素。结果表明7～12周流产儿适于人类胚胎生殖细胞的分离克隆；人类胚胎生殖细胞体外培养以添加15％FBS为宜：添加4ng／mL LIF+4ng／mL bFGF+20ng／mL SCF能明显改善人类胚胎生殖细胞的分离克隆；MEF、STO、bEF和hEF可提高人原始生殖细胞(PGCs)的贴壁率，能促进PGCs源的人类胚胎干细胞(ES)的分离效率；以MEF作为饲养层效果较好。

关 键 词：人类  胚胎生殖细胞 分离  克隆 原始生殖细胞 胚胎干细胞

分 类 号：Q813[生物工程类] Q78