文献类型：期刊文章

作　　者：刘荣昌[1] 张桂红[1] 崔进[1] 谢杰雄[1] 宁章勇[1] 王衡[1]

机构地区：[1]华南农业大学兽医学院广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室,广州广东510642

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31201876;31272564);广东省农业攻关计划资助项目(2012B020306004)

年　　份：2015

卷　　号：35

期　　号：5

起止页码：669-674

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为进一步探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白7(Nsp7)在病毒复制过程中发挥的生物学作用,本研究在获得Nsp7可溶性重组蛋白的基础上,首先制备了抗Nsp7蛋白兔源多克隆抗体。确定抗体的免疫活性后,将其与PRRSV共同接种Marc-145细胞。孵育1h后弃掉混合物,加细胞维持液继续培养48h,应用TaqMan探针Real Time PCR方法对培养物中病毒拷贝数进行检查。结果显示,本研究制备的多克隆抗体可以和大肠杆菌表达的Nsp7α、Nsp7β重组蛋白发生特异性结合,并有效用于病毒感染Marc-145细胞后其Nsp7蛋白分布情况的原位检测;更为重要的是,与正常家兔血清相比,不同稀释倍数的抗Nsp7多克隆抗体均可对病毒的复制产生抑制作用,其中10-3倍稀释血清的抑制率可达88.4%。结果表明,Nsp7特异性抗体可有效用于PRRSV抑制试验的研究;Nsp7作为PRRSV复制酶多聚蛋白成员之一,在病毒复制过程中发挥着重要作用。

关 键 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 非结构蛋白7  病毒抑制

分 类 号：S852.65]