文献类型：期刊文章

作　　者：肖增鸿[1] 黄昭亮[1] 林月霞[1] 董斌[1] 田素娟[1]

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院,广州510006

出　　处：《中国医药生物技术》

基　　金：广东省大学生创新实验项目(1057310037)

年　　份：2013

卷　　号：8

期　　号：6

起止页码：425-428

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的比较不同纯化方法对腹水型抗体的纯化效果,探索出最适合实验室抗体生产的纯化方法。方法制备的IgG1单克隆抗体腹水(4-D10)分别利用两步硫酸铵沉淀法(AS法)、辛酸-硫酸铵沉淀法(CA-AS法)、辛酸-硫酸铵沉淀法联合DEAE阴离子交换层析法与辛酸-硫酸铵沉淀法联合蛋白G亲和层析法纯化处理后,经蛋白纯度、回收率、抗体免疫活性鉴定分析后,比较不同的纯化方法对腹水型抗体的纯化效果。结果①AS法的蛋白纯度为25%,低于CA-AS法(44%);AS法回收率为63%,高于CA-AS法(41.8%);比较抗体效价表明,AS法(1.024×106)与CA-AS法(1.024×106)两者相当。②粗提后纯化效果表明,蛋白G亲和层析法回收率明显降低,DEAE纯品虽纯度略低,但回收率较高,且效价(5.12×105)高于蛋白G亲和层析法(1.28×105)。结论 CA-AS联合DEAE离子交换法是适合实验室生产单抗的低成本、纯化效果和回收效果较佳的方法。

关 键 词：抗体,单克隆  分步沉淀 色谱法 离子交换

分 类 号：R392]