文献类型：期刊文章

作　　者：李文生[1,2] 郑瑾[1] 刘红莉[1] 陈宏伟[1] 杨军[1] 王一理[1] 司履生[1]

机构地区：[1]西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安710061 [2]西安交通大学陕西临床学院

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 2 71184)~~

年　　份：2004

卷　　号：20

期　　号：4

起止页码：536-539

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：利用PCR技术克隆截短型HPV5 8L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac Htb ,通过转座反应 ,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组 ,分离重组的BacmidDNA ,并转染Sf 9昆虫细胞 ,收集被转染的Sf 9细胞 ,提取细胞蛋白 ,SDS PAGE检测可见在大约 5 8Kda处出现一新生蛋白条带 ,Westernblot证实为HPV5 8L1蛋白。用ProBondTM 纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集 ,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV5 8L1蛋白 ,纯化后的截短型HPV5 8L1蛋白在体外可自组装VLP 。

关 键 词：截短型HPV58  L1蛋白 昆虫-杆状病毒表达系统  蛋白纯化 病毒样颗粒

分 类 号：R73-3]