文献类型：期刊文章

作　　者：陈丹[1] 王宏[1] 朱中松[1] 向军俭[1] 杨琴[2] 赵鑫[1] 邓宁[1]

机构地区：[1]暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心 [2]广州铭康生物工程有限公司

出　　处：《免疫学杂志》

基　　金：广州市科技攻关重点项目(2006Z2-E4051);广东省生物工程药物重点实验室开放基金(51206001)资助

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：4

起止页码：469-472

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的获得编码VEGF189蛋白的基因,并通过原核表达系统表达VEGF189融合蛋白。方法应用SOE PCR技术合成VEGF189基因,克隆入pET-32a(+)原核表达载体,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经HisTrapTMHP亲和柱层析纯化,测定蛋白浓度。结果DNA测序分析表明,合成的VEGF189基因与文献报道相一致。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的Trx-VEGF189融合蛋白,以包涵体和可溶2种形式存在。表达产物可被兔抗鼠VEGF多抗特异识别。经HisTrapTMHP亲和柱纯化,获得纯度达85%的融合蛋白。结论成功合成VEGF189基因,并在原核表达系统中获得高表达,为研制高效抗肿瘤的VEGF抗体和疫苗奠定了前期基础。

关 键 词：VEGF189  SOEPCR  原核表达

分 类 号：Q786]