文献类型：期刊文章

作　　者：唐勇[1] 王建华[1] 向军俭[1] 王宏[1] 邓宁[1] 杨红宇[1]

机构地区：[1]暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心

出　　处：《免疫学杂志》

基　　金：广东省科技计划面上项目(2003C20411);"十一五"国家科技支撑计划项目子项目(2008BAK42B05)

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：2

起止页码：214-217

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备Cd2+单克隆抗体(McAbs,单抗),建立Cd2+间接竞争酶免疫学检测方法(ELISA)。方法利用双功能螯合剂iEDTA将Cd2+分别与血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备免疫抗原和检测抗原。免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术制备抗Cd2+的单抗。鉴定单抗的效价、特异性、亚类及亲和力。以该抗体为基础建立检测镉离子的间接竞争ELISA方法,分析该方法的灵敏度、检测限、工作范围。结果成功制备出Cd-iEDTA-KLH和Cd-iEDTA-BSA偶联物;筛选出一株稳定分泌抗Cd-iEDTA单抗的杂交瘤细胞株C2C5,该细胞株分泌的抗体亚类为IgG1,腹水抗体效价为1×106,相对亲和力结合常数Ka为1.6×109L/mol。特异性结果显示,除Hg2+外,该抗体与Pb2+、Fe3+、Mn2+、Mg2+、Zn2+、Al3+、Ni2+、Ca2+、Cu2+等金属离子的交叉反应低。建立了检测镉离子的间接竞争ELISA方法,该方法的检测限为10ng/mL,IC50为250ng/mL。结论建立了镉离子的竞争ELISA检测方法,检测限达到无公害水产品的国家标准(100ng/g)。

关 键 词：镉离子 单克隆抗体 竞争ELISA

分 类 号：R392.33]