文献类型：期刊文章

作　　者：刘瑞振[1] 张长弓[1] 何琼[2] 苏金华[1] 陈彩霞[1] 陈福[1] 庄国洪[1]

机构地区：[1]厦门大学医学院抗癌研究中心 [2]厦门市波生生物技术有限公司

出　　处：《免疫学杂志》

基　　金：厦门大学科研启动资金(Z03103);厦门市科技计划项目(3502Z20083008)资助

年　　份：2009

期　　号：1

起止页码：34-38

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备抗DcR3单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性,并应用于ELISA、Western blot、Flowcytometry(FCM)检测。方法以纯化的可溶性DcR3(sDcR3)免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗DcR3 mAb。用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DcR3mAb的亚类。用ELISA方法测定抗DcR3 mAb与sDcR3结合的特性,SDS-PAGE鉴定抗DcR3 mAb与SW480细胞上清中DcR3结合的特性,以鉴定mAb的特性。用间接ELISA法检测腹水mAb的效价、亲和常数并进行表位分析。Western blot检测mAb的特异性及应用,并用所获抗DcR3单克隆抗体(mAb)通过流式细胞仪检测肿瘤细胞表面DcR3的表达水平。结果获得4株可分泌DcR3 mAb的杂交瘤细胞系ZZ-393、ZZ-394、ZZ-151和ZZ-268。其中DcR3 mAb ZZ-268(下文简称为ZZ-268)的Ig亚类为IgG1(κ型);腹水效价为1×10-5;亲和常数为1.28×109水平;ZZ-268和ZZ-151可识别与其他2种抗体不同的抗原表位;Western blot证实,获得的ZZ-268可特异性地识别DcR3;通过流式细胞术可敏感地检测到不同肿瘤细胞表面DcR3的表达水平。结论获得4株抗DcR3的mAb,其中ZZ-268效价高、特异性强,将此抗体用于膜DcR3与sDcR3的检测分析。

关 键 词：DCR3 单克隆抗体 制备  

分 类 号：R392.11]