期刊文章详细信息
牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立
Establishment of antigen-captured ELISA using monoclonal antibodies to detect bovine viral diarrhea virus
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]四川农业大学动物科技学院,四川雅安625014 [2]新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子832000
基 金:国家成果转化资金资助项目(03EFN21610266);新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放课题资助项目(05KL09)
年 份:2008
卷 号:28
期 号:9
起止页码:1004-1007
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:以纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为抗原免疫BALB/C系小鼠,通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种于BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水,腹水单抗与BVDV均呈阳性反应。将5A9、2G3和5C2(分别结合不同的抗原结合位点)诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板,与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度,用阴性组织样品作为判定检测结果的D490临界值,最后以建立的AC-ELISA检测临床粪样棉拭子27份,结果表明:该方法敏感性、特异性高,与全血病毒分离结果的符合率达86.36%;与全血和粪样RT-PCR检测结果的符合率分别为89.47%和94.74%。阴性对照RT-PCR、病毒分离和AC-ELISA检测均为阴性。
关 键 词:牛病毒性腹泻病毒 单克隆抗体 IGY 抗原捕获ELISA
分 类 号:S854.43]
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