文献类型：期刊文章

作　　者：段志坚[1] 高波[1] 徐薇[1] 周倩[1] 熊思东[1]

机构地区：[1]复旦大学免疫生物学研究所复旦大学上海医学院免疫学系,上海200032

出　　处：《现代免疫学》

基　　金：国家863资助项目(2006AA02Z403);上海市医学领军人才基金资助项目(LJ06011)

年　　份：2008

卷　　号：28

期　　号：4

起止页码：285-290

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：研究TRIM22对Jurkat T增殖的影响,探讨TRIM22分子的生物学效应。分离人外周血单个核细胞,获得其细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增人TRIM22基因,经Nhe I和Hind III双酶切后插入pcDNA3.1/myc-His(-)真核表达载体,并对其进行酶切和测序鉴定。将构建好的真核表达质粒pcDNA/TRIM22转染Jurkat T细胞,用Western blot方法鉴定TRIM22蛋白表达情况,用CCK-8试剂检测TRIM22对T细胞增殖的影响,用双荧光素酶报告基因方法检测TRIM22对IL-2基因启动子的转录活性,用半定量RT-PCR方法检测TRIM22对IL-2 mRNA表达水平的影响。结果:成功构建了C端带有myc标记的真核表达质粒pcDNA/TRIM22,质粒转染Jurkat T细胞后能够表达TRIM22蛋白,细胞增殖检测结果显示TRIM22能够降低Jurkat T细胞的增殖达30%左右,报告基因检测结果显示TRIM22能够抑制IL-2启动子活性达20%至50%,过表达TRIM22降低IL-2 mRNA表达水平,这些结果为进一步深入研究TRIM22的生物学特性奠定了基础。

关 键 词：TRIM22  真核表达 细胞增殖 IL-2

分 类 号：R392]