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期刊文章详细信息

GST-Jab1融合蛋白表达载体的构建及表达纯化    

Expression and purification of GST-Jab1 in E coli

  

文献类型:期刊文章

作  者:黄瑾[1] 郑玉建[1] 鲁重元[2] 万梅[2]

机构地区:[1]新疆医科大学公共卫生学院 [2]阿拉巴马大学医学院病理系,美国阿拉巴马州伯明翰35294

出  处:《石河子大学学报(自然科学版)》

基  金:美国NIH项目(CA112942-01)提供部分资助

年  份:2007

卷  号:25

期  号:5

起止页码:585-588

语  种:中文

收录情况:CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘  要:目的获取GST-Jab1蛋白,进一步研究Jab1的功能。方法以pMSCVneo-Jab1为模板,PCR扩增Jab1 DNA片断,EcoRI和XhoI双酶切后克隆至pGEX-5X-1表达载体,测序验证。将正确重组的pGEX-5X-1-Jab1表达质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导后,超声破碎细胞,用GST琼脂糖珠对上述表达产物进行纯化,SDS-PAGE、Western Blot分析和鉴定诱导表达和纯化的GST-Jab1蛋白质。结果成功构建了pGEX-5X-1-Jab1重组表达载体,SDS-PAGE分析结果显示表达和纯化的蛋白质与融合蛋白GST-Jab1预期分子量一致,Western Blot鉴定结果证实纯化的蛋白质为GST-Jab1。结论成功地表达、纯化了GST-Jab1融合蛋白。

关 键 词:JAB1 GST融合蛋白原核表达  蛋白质纯化

分 类 号:Q78]

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