文献类型：会议

作　　者：李战彪 陈建兴 宋振华 杜欢 闵令江 沈伟 潘庆杰

作者单位：青岛农业大学动物科技学院动物生殖发育与基因工程研究所,山东 青岛,266109

会议文献：中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会论文集

会议名称：中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

会议日期：20080800

会议地点：青岛

主办单位：中国畜牧兽医学会

出版日期：20080800

语　　种：中文

摘　　要：精子介导基因转移(SMGT)是目前转基因动物研究中简单而高效的方法之一，其中精子结合和内化外源基因的效率是精子介导转基因成功的关键。本文以DIG标记的线性化EGFP作为示踪基因来检测猪精子结合和内化外源基因的影响因素，结果表明：猪精子能够自发结合外源基因，结合部位主要在精子顶体后区。精子结合外源DNA的阳性率随共孵育时间延长而增加，在37℃或39℃时孵育60分钟后，阳性率不再增加;在17℃时孵育90分钟后，阳性率不再增加。在检查的15只公猪样本中，精子与外源DNA的结合率为6.57％-35.81％，内化率为2.99％-24.66％，个体间差异显著(p＜0.01)。精浆能够强烈抑制外源基因的结合和内化，脂质体及DMSO能够显著提高转染效率。死精子能够结合外源基因，但不能将其内化;反复冻融导致质膜破裂的精子对外源基因有更高的结合率，且不受个体影响。

关 键 词：精子介导 基因转移 外源基因 转基因动物 DIG标记  猪  

分 类 号：S828.2]