文献类型：会议

作　　者：程永婷 贾晓晖 赵霞 李婷 贾天军

作者单位：河北北方学院医学检验学院病原生物与免疫学研究所

会议文献：第十届全国检验与临床学术会议暨2015年中国医师协会检验医师年会论文集

会议名称：第十届全国检验与临床学术会议暨2015年中国医师协会检验医师年会

会议日期：20150702

会议地点：郑州

主办单位：中国医师协会检验医师分会

出版日期：20150702

语　　种：中文

摘　　要：目的：构建人高尔基复合体相关蛋白(FXYD5)基因真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达,研究肺炎衣原体0147基因与其相互作用方法：提取Hela 细胞的全部RNA,反转录成cDNA,以其作为模板,设计含特异性酶切位点的引物,利用PCR 技术扩增目的片段,经KpnI,EcoRI 双酶切,插入真核表达载体pcDNA3.1+/Flag 质粒中构建成pcDNA3.1+/Flag-FXYD5 重组质粒,转入大肠杆菌XL1-Blue 进行重组质粒的扩增,氨苄青霉素筛选阳性克隆,经过菌落PCR,双酶切,基因测序验证正确后,应用脂质体法转染HeLa 细胞,用间接免疫荧光法检测细胞内FXYD5 基因的表达.

关 键 词：FXYD5基因  载体构建  

分 类 号：R65] R73[临床医学类]