文献类型：会议

作　　者：冯伟 李敏启

作者单位：山东大学口腔医学院骨代谢研究室山东省口腔组织再生重点实验室

会议文献：2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会论文汇编

会议名称：2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

会议日期：20161104

会议地点：中国辽宁大连

主办单位：中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会（Society of Oral Biomedicine Chinese Stomatological Association）

出版日期：20161104

学会名称：中华口腔医学会

语　　种：中文

摘　　要：目的:本实验旨在探究IL-6及其可溶性受体(soluble IL-6 receptor,s IL-6R)对不同浓度RANKL诱导的破骨细胞分化和活性的影响及其内在机制。材料和方法:小鼠骨髓单核巨噬细胞(bone marrow macrophages,BMMs)和小鼠白血病细胞RAW264.7作为小鼠破骨细胞前体细胞接种于含有不同浓度(10-100ng/ml)的RANKL和30ng/ml M-CSF的破骨细胞诱导培养液中,同时加入或不加入系列浓度(0-100ng/ml)的IL-6和s IL-6R进行连续培养,在指定时间点收集细胞用于后续实验检测。诱导培养2天后,q RT-PCR检测破骨细胞标志性基因降钙素受体(calcitonin receptor,CTR)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CK)m RNA的表达。诱导培养4天后行细胞TRAP染色以显示分化的多核破骨细胞。诱导培养14天后行pitformation破骨细胞吸收活性检测。此外,Western blotting检测破骨细胞转录因子NFATc1、c-fos的表达以及RANKL-RANK下游信号通路NF-k B和MAPKs(ERK1/2、JNK、p38)的激活状况。结果:TRAP染色显示IL-6/s IL-6R显著促进了低浓度(10ng/ml)RANKL诱导的小鼠破骨细胞前体细胞向成熟的多核破骨细胞分化而明显抑制高浓度(50ng/ml)RANKL诱导的破骨细胞生成。另外,IL-6/s IL-6R对破骨细胞吸收活性、破骨细胞标志性基因m RNA及转录因子表达的影响也呈现RANKL浓度差异性,即对低浓度RANKL诱导作用的促进和对高浓度RANKL诱导作用的抑制,变化趋势与TRAP染色结果一致。Western blotting结果表明IL-6/s IL-6R上调了低浓度RANKL诱导的NF-k B和ERK1/2、JNK信号通路的激活却下调了高浓度RANKL诱导上述三条信号通路的激活。结论:IL-6/s IL-6R通过NF-k B和ERK1/2、JNK信号通路表现了对不同浓度RANKL诱导的破骨细胞分化和功能的差异性调节。

关 键 词：IL-6 RANKL 破骨细胞

分 类 号：R78[口腔医学类]