文献类型：会议

作　　者：范莹娟 周义湘 许建华

作者单位：福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室

会议文献：2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议摘要汇编

会议名称：2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议

会议日期：20150424

会议地点：中国辽宁沈阳

主办单位：中国工程院医药卫生学部;中国抗癌协会抗癌药物专业委员会;中国药理学会肿瘤药理专业委员会

出版日期：20150424

学会名称：中国抗癌协会

语　　种：中文

摘　　要：目的研究姜黄素衍生物C1209对Hsp90的抑制作用与抗白血病的关系。方法(1)采用荧光光谱法,实验选取280nm为激发波长,290-510nm的波长范围内进行荧光光谱扫描,研究不同浓度C1209与Hsp90的相互作用:(2)采用孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,研究C1209对Hsp90-ATPase活性抑制;(3)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和CFSE染色法体外检测C 1209对白血病细胞K562及耐IM的白血病细胞K562/G细胞的增殖抑制作用;(4)通过FITC/PI双染法检测C1209对K562和K562/G细胞的凋亡作用;(5)采用JC-1检测C1209对K562和K562/G细胞作用后,对线粒体膜电位的影响;(6)通过PI染色法测定细胞周期;(7)应用蛋白免疫印迹法检测线粒体凋亡相关蛋白的表达及Hsp90客户蛋白、分子伴侣的表达。结果(1)C1209解离常数为14.733±0.713μmol·L;热力学参数AH=-7.60±1.79kJ·mol,△S=68.08±5.91 J·mol·k,表明C1209与Hsp90之间的主要作用力为静电作用力,C1209与Hsp90形成静态复合物;当△λ=15 nm和△λ=60 nm时,随着C1209的加入,体系同步荧光的最大荧光发射波长基本不变,说明Hsp90中酪氨酸残基和色氨酸残基周围微环境没有发生明显改变,且未显著降低其所处的微环境疏水性,没有明显改变肽链伸展程度,这表明随着C1209浓度的增加并没有使Hsp90中的酪氨酸、色氨酸残基的构象发生变化。C1209与CHsp90片段的结合能力最强;(2)C1209呈剂量依赖性的抑制Hsp90的ATPase活性,IC为11.4μmol·L;(3)C1209呈剂量依赖性的抑制K562和K562/G细胞的增殖,作用24h,IC为1.14μmol·L和0.56μmol·L;(4)C1209作用K562和K562/G细胞随着药物浓度的增加,细胞凋亡率趋势增加;(5)C1209作用K562和K562/G细胞后,线粒体膜电位发生明显的变化,线粒体膜电位耗散程度增加;(6)C1209对K562和K562/G细胞周期的S期有明显的阻滞作用;(7)C1209通过线粒体caspase-9/caspase-3途径诱导K562和K562/G细胞凋亡;(8)C1209影响Hsp90的分子伴侣功能且下调K562和K562/G细

关 键 词：姜黄素 C1209  荧光光谱法 凋亡  线粒体 HSP90

分 类 号：R96]