文献类型：会议

作　　者：曹芸运 王文婧 张娜 郭仰东

作者单位：中国农业大学园艺学院蔬菜系

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD1000800)

会议文献：中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集

会议名称：中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会

会议日期：20191021

会议地点：中国河南郑州

出版日期：20191000

学会名称：中国园艺学会

语　　种：中文

摘　　要：茉莉酸是一种植物防卫反应中重要的调节激素,其通过核心转录因子MYC2启动并级联放大茉莉酸信号转导通路,从而开启植物防卫反应抵抗病虫害。萜类是一类次生代谢产物,具有抗虫的效果,其合成代谢受茉莉酸调控。本研究解析了一个受茉莉酸强烈诱导的bHLH类型转录因子SlWin4,参与并调控茉莉酸诱导的萜类物质合成机制。以‘Micro Tom’番茄为材料,发现了1个受茉莉酸强烈诱导的bHLH类型转录因子基因SlWin4,利用荧光定量PCR分析发现SlWin4的表达受到茉莉酸的强烈诱导。利用亚细胞定位和酵母单杂交试验及转录抑制活性检测,发现SlWin4并不是一个典型的、定位在细胞核的、具有转录激活活性的转录因子。蛋白–DNA互作分析发现该基因受到MYC2转录因子的直接调控,位于茉莉酸信号转到途径的下游。进一步通过基因过表达、CRISPR敲除及转录组分析等,发现该基因参与了萜类物质的合成。SlWin4的表达在MeJA处理1 h时上升了近百倍,属于早期响应基因。茉莉酸信号途径中的核心转录因子MYC2下调表达的株系中,SlWin4的表达量相应降低,推测该基因位于MYC2转录因子的下游。进一步通过酵母单杂交、双荧光素酶等试验证明,MYC2可以直接结合到该基因的启动子上,说明SlWin4作为下游基因受到MYC2转录因子的直接调控。酵母单杂交试验发现,SlWin4不具有转录激活活性。利用Luciferase试验证明,SlWin4具有转录抑制活性,推测其作为转录抑制子抑制下游基因表达。亚细胞定位结果表明,SlWin4蛋白在细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核中均有定位,这与经典的核定位转录因子不同,推测其可能还具有转录因子之外的其他功能。为了进一步探索SlWin4的功能,创建了SlWin4的过表达和CRISPR株系。对该基因的CRISPR株系和野生型植株进行转录组测序发现,其差异基因主要富集在次生代谢物合成方面,尤

关 键 词：番茄 茉莉酸 bHLH转录因子  萜类 转录抑制

分 类 号：S641.2]