文献类型：会议

作　　者：邓垂文 胡朝军 王立 张蜀澜 李萍 吴子燕 陈思 张奉春 李永哲

作者单位：中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院风湿免疫科,风湿免疫病教育部重点实验室

会议文献：第九届全国免疫学学术大会论文集

会议名称：第九届全国免疫学学术大会

会议日期：20141018

会议地点：中国山东济南

主办单位：中国免疫学会（Chinese Society for Immunology）

出版日期：20141000

学会名称：中国免疫学会

语　　种：中文

摘　　要：背景:亟需寻找原发性胆汁性肝硬化(primarybiliary cirrhosis,PBC)患者抗线粒体抗体(anti-mitochondrialantibody,AMA)阳性与阴性间尚无鉴别诊断血清标志物。目的:探讨双向荧光差异凝胶电泳(2-D fluorescence difference gel electrophoresis,DIGE)联合串联基质辅助激光解吸飞行质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization tandem time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF MS)筛选出的PBC患者AMA阳性与阴性间血清标志物的意义。方法:收集PBC患者20例。其中AMA阳性患者10例(女8例,男2例),平均年龄(56±8)岁,年龄455岁;AMA阴性(间接免疫荧光法测AMA及酶联免疫吸附法测AMA-M2均为阴性)患者10例(女8例,男2例),平均年龄(53±7)岁,年龄432岁。所有患者的诊断均符合AASLD标准。20名患者均进行了肝脏组织活检,AMA阳性组肝穿病理分期为Ⅰ期的患者4例,Ⅱ期的患者4例,Ⅲ期的患者2例。AMA阴性组肝脏病理分期同AMA阳性组。首先使用DIGE技术对筛选组(4对性别、年龄和病理分期匹配的AMA阳性和AMA阴性PBC患者)进行血清差异表达蛋白质点分析,而后使用MALDI-TOF/TOF MS对这些蛋白质进行进一步的鉴定。最后使用western blot法在所有样本中对鉴定得到的玻连蛋白进行表达水平验证。结果:DIGE在PBC患者中分离获得1840个蛋白质点。结果经生物信息学分析后发现,组间差异倍数>1.5或<-1.5以上的点共有28个差异点(P<0.05)。其中,AMA阳性组患者较阴性组表达上调的蛋白质点共9个,而相对表达下调的蛋白质点共19个。经进一步鉴定最终得到4个蛋白质,血清淀粉样成分P、维生素D结合蛋白、玻连蛋白和α1微球蛋白/bikunin前体。Western blot验证结果显示,AMA阴性的PBC患者其玻连蛋白表达水平高于AMA阳性患者。结论:本研究首次使用蛋白质组学技术探寻AMA阳性与AMA阴性PBC患者之间的血清标志物,研究结果表明DIGE联合MALDI-TOF/TOF MS技术是筛选此类�

关 键 词：原发性胆汁性肝硬化 双向荧光差异凝胶电泳  血清标志物

分 类 号：R575.22]