文献类型：会议

作　　者：刘颖 梁华征 叶诸榕 孙景军

作者单位：复旦大学上海医学院病理系 复旦大学上海医学院病理系 复旦大学上海医学院病理系 复旦大学上海医学院病理系

会议文献：中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编

会议名称：中华医学会病理学分会2006年学术年会

会议日期：20060600

会议地点：中国宁夏银川

主办单位：中华医学会病理学分会

出版日期：20060600

学会名称：宁夏医学会

语　　种：中文

摘　　要：目的探讨ATP是否促进原代培养的星形胶质细胞(astrocytes,As)发生类似反应性星形胶质化的变化以及嘌呤类受体P2X7在该过程中的作用。方法原代星形胶质细胞的分离和培养;实时照相观察As形态变化;BrdU掺入法及流式细胞观察As增殖变化;逆转录RT和 realtime-PCR检测GFAPmRNA,P2X7mRNA, TGF-β1mRNA表达变化;western-blot检测GFAP 表达;ELISA检测培养上清中TGFβ1的变化。结果成功分离并培养出原代As,免疫荧光鉴定阳性率为99％。不同浓度ATP(50μ M,100μ M, 500μ M)作用于As均可使之表现出类似反应性胶质化的形态改变,表现为胞浆丰富,细胞突起增加且更为明显。ATP 100μ M作用1d后As的S 期细胞数目明显增加,提示细胞增殖的活跃,溴脱氧尿嘧啶核苷(Bromodeoxyuridine,BrdU)掺入法显示细胞核阳性率明显增加。500μ M浓度的 ATP能促进As的GFAPmRNA,P2X7mRNA表达。 2’-3’-O- (4-benzoylbenzoyl)-adenosine-5’- triphosphate(BzATP)为P2X7特异性的受体激动剂。50μ M,75μ M,100μ M BzATP作用于原代培养的As,在培养基有Ca2+情况下可明显促进 GFAP表达。在培养基有Ca2+情况下BzATP作用 2h及12h时As中TGFβ1 mRNA的升高。培养上清中TGF-β1蛋白的含量在8h及48h均有升高。TGFβ1中和抗体能部分抑止P2X7引起的As GFAP含量的增加。结论 100μM的ATP可以促进As增殖。各种浓度ATP均可促进As形态产生类似胶质化反应的变化。此种变化部分由P2X7受体介导。P2X7受体在有Ca2+能促进TGFβ1的转录和释放,TGFβ1参与了P2X7受体诱导的类似反应性星形胶质化过程。

关 键 词：ATP 原代培养星形胶质细胞  反应性星形胶质化  P2X7受体 TGF-Β1

分 类 号：R329]